protocole:techniques:introduction_aux_techniques_extraction_adn
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===== Intro ===== | ===== Intro ===== | ||
- | Le premier isolement de l' | + | Le premier isolement de l' |
<WRAP center round tip 60%> | <WRAP center round tip 60%> | ||
Ligne 36: | Ligne 36: | ||
* Extraction phénol-chloroforme dans laquelle le phénol dénature les protéines de l' | * Extraction phénol-chloroforme dans laquelle le phénol dénature les protéines de l' | ||
* Purification sur minicolonne qui repose sur le fait que les acides nucléiques peuvent se lier (adsorption) à la phase solide (silice ou autre) en fonction du pH et de la concentration en sel du tampon. | * Purification sur minicolonne qui repose sur le fait que les acides nucléiques peuvent se lier (adsorption) à la phase solide (silice ou autre) en fonction du pH et de la concentration en sel du tampon. | ||
+ | |||
+ | //Voir aussi : [[: | ||
Les protéines cellulaires et histones liées à l'ADN peuvent être éliminées soit par l' | Les protéines cellulaires et histones liées à l'ADN peuvent être éliminées soit par l' | ||
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==== Extraction par chélation ==== | ==== Extraction par chélation ==== | ||
- | La méthode d' | + | La méthode d' |
Les matières cellulaires se lient aux billes de la solution de chélation, tandis que l'ADN devient disponible dans la couche liquide qui surnage. | Les matières cellulaires se lient aux billes de la solution de chélation, tandis que l'ADN devient disponible dans la couche liquide qui surnage. | ||
Ligne 78: | Ligne 80: | ||
==== voir également ==== | ==== voir également ==== | ||
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+ | **Autres Chélateurs**(([[https:// | ||
+ | |||
+ | * [[wp> | ||
+ | * [[wp> | ||
+ | * 2,2 Bypidryl | ||
+ | * [[wp> | ||
+ | |||
+ | ===== Méthodes pour cas spécifiques ===== | ||
+ | |||
+ | Des techniques spécifiques doivent être choisies pour isoler l'ADN de certains échantillons pour lesquels l' | ||
+ | |||
+ | * les échantillons contenant des inhibiteurs des procédures d' | ||
+ | * les échantillons provenant de micro-organismes à paroi cellulaire épaisse, par exemple les levures | ||
+ | * les échantillons contenant de l'ADN mélangé provenant de sources multiples | ||
+ | * * les échantillons archéologiques contenant de l'ADN partiellement dégradé, voir de l'ADN très ancien | ||
+ | |||
+ | L'ADN extrachromosomique est généralement facile à isoler, en particulier pour les plasmides peuvent être facilement isolés par lyse cellulaire suivie d'une précipitation des protéines, ce qui piège l'ADN chromosomique dans la part insoluble et après centrifugation, | ||
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+ | L' | ||
{{tag> ADN Protocole}} | {{tag> ADN Protocole}} |
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