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protocole:techniques:introduction_aux_techniques_extraction_adn

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protocole:techniques:introduction_aux_techniques_extraction_adn [2021/11/09 16:06] – [voir également] amélioration de texte xavccprotocole:techniques:introduction_aux_techniques_extraction_adn [2021/11/09 16:18] (Version actuelle) – [Procédure standard] ajout delien vers future page xavcc
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 ===== Intro ===== ===== Intro =====
  
-Le premier isolement de l'acide désoxyribonucléique (ADN) a été effectué en 1869 par Friedrich Miescher.+Le premier isolement de l'acide désoxyribonucléique (ADN) a été effectué en 1869 par [[wp>fr:Friedrich Miescher|Friedrich Miescher]].
  
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         * Extraction phénol-chloroforme dans laquelle le phénol dénature les protéines de l'échantillon. Après centrifugation de l'échantillon, les protéines dénaturées restent dans la phase organique tandis que la phase aqueuse contenant l'acide nucléique est mélangée avec du chloroforme pour éliminer les résidus de phénol de la solution.         * Extraction phénol-chloroforme dans laquelle le phénol dénature les protéines de l'échantillon. Après centrifugation de l'échantillon, les protéines dénaturées restent dans la phase organique tandis que la phase aqueuse contenant l'acide nucléique est mélangée avec du chloroforme pour éliminer les résidus de phénol de la solution.
         * Purification sur minicolonne qui repose sur le fait que les acides nucléiques peuvent se lier (adsorption) à la phase solide (silice ou autre) en fonction du pH et de la concentration en sel du tampon.         * Purification sur minicolonne qui repose sur le fait que les acides nucléiques peuvent se lier (adsorption) à la phase solide (silice ou autre) en fonction du pH et de la concentration en sel du tampon.
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 +//Voir aussi : [[:protocole:techniques:billes_silicates_purification_adn|Billes de silicates et purification d'ADN]]//
  
 Les protéines cellulaires et histones liées à l'ADN peuvent être éliminées soit par l'ajout d'une protéase, soit en ayant précipité les protéines avec de l'acétate de sodium ou d'ammonium, soit en les extrayant avec un mélange phénol-chloroforme avant la précipitation de l'ADN. Les protéines cellulaires et histones liées à l'ADN peuvent être éliminées soit par l'ajout d'une protéase, soit en ayant précipité les protéines avec de l'acétate de sodium ou d'ammonium, soit en les extrayant avec un mélange phénol-chloroforme avant la précipitation de l'ADN.
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 ==== voir également ==== ==== voir également ====
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 +**Autres Chélateurs**(([[https://openwetware.org/wiki/User:Alexander_Cvitan/Notebook/Experimental_Biological_Chemistry_Lab ]]2014/01/29|Alexander Cvitan/Notebook/Experimental Biological Chemistry Lab/2014/01/29)) potentiels
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 +  * [[wp>fr:EDTA]], acide éthylènediaminetétraacétique
 +  * [[wp>EGTA_(chemical)|EGTA]] egtazic acid
 +  * 2,2 Bypidryl
 +  * [[wp>fr:Acide_salicylique|Acide Salicylique]]
  
 ===== Méthodes pour cas spécifiques ===== ===== Méthodes pour cas spécifiques =====
protocole/techniques/introduction_aux_techniques_extraction_adn.1636474019.txt.gz · Dernière modification : 2021/11/09 16:06 de xavcc